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酶
常见问题解答
1．与现有的
Taq DNA polymerase
比较 Top
DNA polymerase有什么优点？
2．Bioneer的HotStart
DNA polymerase与目前常用的HotStart
DNA polymerase有什
么不同？
3．HotStart
DNA polymerase有什么特点？
4．TLA
DNA polymeras有什么特点？
5．CycleScript
Reverse Transcriptase (CTase)与普通逆转录酶有什么不同？
6．CycleScript
Reverse Transcriptase (CTase)在进行逆转录时有什么优势？
Q1．与现有的
Taq DNA polymerase
比较
Top DNA polymerase有什么优点？
↑TOP
A1. 比Taq有更好的
lamda, human, bacteria sensitivity；比Taq有更好的扩增效率；比Taq有更好的扩增特异性。
Q2．Bioneer的HotStart
DNA polymerase与目前常用的HotStart
DNA polymerase有什么不同? ↑TOP
A2. 现有的
HotStart DNA polymerase
产品是利用
Antibody的在常温下把DNA
polymerase Inactivation
的方法；本产品是使用Pyrophosphaste(Ppi)和
Thermostable pyrophosphatase(Ppase)的
Chemical 方法
(专利:10-0292883)。
Q3．HotStart
DNA polymerase有什么特点？
↑TOP
A3. 利用Ppi,
Ppase的新概念
Chemical method的
HotStart DNA polymerase
-
开发高温(80℃)有最佳活性的
Ppase(申报专利之中)的产品，
适用于产品， 有
High-specificity
- High
Sensitivity
- Improve
product yields
- Reduce
nonspecific background
-
使用没有5’-3’
exonuclease acitivity的Top
DNA polymerase，不能用于
Taqman probe的
quantification PCR ,
상대可利用于
Sybr Green的
quantification PCR
Q4．TLA
DNA polymeras有什么特点？
↑TOP
A4.
TLA DNA polymerase是
韩国海洋研究院在南太平洋的深海发掘,
分离并加上百奥尼公司的技术力量，
提高了Fidelity,
processivity, amplification yield
， 是
Thermococcus onnurineus NA1
由来的
DNA polymerase，是韩国国内自主开发的有国际竞争力的产品。其具有高灵敏性，
没有 smearing 现象,
能得到清晰的
PCR 产物，可应用于Long
Kb PCR, 能扩增20
Kb PCR products。
Q5．CycleScript
Reverse Transcriptase (CTase)与普通逆转录酶有什么不同？
↑TOP
A5.
CycleScript Reverse Transcriptase (CTase)是在高纯度
modified MMLV
逆转录酶里加了酶的稳定剂,
活性在
55℃也可以维持。
在高温之中可以合成
cDNA。 现有的
42℃
单一温度的逆转录反应
(Fixed Temperature Reverse Transcription, FTRT) , PCR
反应的
2-3 阶段通过依次变化温度，进行
(Cyclic Reverse Transcription, CRT)。
Q6．CycleScript
Reverse Transcriptase (CTase)在进行逆转录时有什么优势？
↑TOP
A6. 循环逆转录反应是在低温(15~40℃)
引导primer的均一的annealing，在高温反应(50~55℃)，减少Template
RNA的2次结构的形成，
合成高效率的cDNA。1.
解决primer
unbiding；
2. Template RNA 2次构造形成，使cDNA
合成中，没有阻断现象，高效率的合成
6kb以上的long
cDNA。
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